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轉(zhuǎn)基因品系棉花MON15985 PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
血平板 (成品培養(yǎng)基)規(guī)格: 20個(gè)/盒作用: 用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)
哥倫比亞血平板(成品培養(yǎng)基)規(guī)格: 20個(gè)/盒作用: 用于一般病原菌的分離培養(yǎng)和溶血性細(xì)菌的鑒別
改良克氏雙糖培養(yǎng)基規(guī)格: 250g作用: 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的鑒定
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基規(guī)格: 250g作用: 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)
半固體瓊脂規(guī)格: 250g作用: 供細(xì)菌動(dòng)力觀察、菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等。(美國(guó)FDA、SN、GB)
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂規(guī)格: 250g作用: 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)。(GB、SN)
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格: 250g作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)
尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格: 250g作用: 用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn)
緩沖動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基規(guī)格: 250g作用: 供產(chǎn)氣莢膜梭菌動(dòng)力和硝酸鹽還原測(cè)定用
動(dòng)力—硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)規(guī)格: 250g作用: 供鑒別測(cè)定細(xì)菌液化明膠用
明膠培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)明膠)規(guī)格: 100g作用: 供測(cè)定細(xì)菌液化明膠使用
克氏雙糖鐵瓊脂規(guī)格: 250g作用: 用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖,及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。(ISO)
緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)規(guī)格: 250g作用: 用于MR和VP試驗(yàn)
Koser氏枸椽酸鹽肉湯規(guī)格: 100g作用: 用于細(xì)菌的枸櫞酸鹽的試驗(yàn)
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基規(guī)格: 100g作用: 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)