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小鼠套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
甘油酯激酶線粒體抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
自噬體ATG16L2蛋白抗體
睪丸酸性磷酸酶抗體
酸性磷酸酶抗體
極光激酶A相互作用蛋白1抗體
載脂蛋白樣蛋白6抗體
凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體
A2LD1蛋白抗體
α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體
芳香乙酰胺脫乙?;缚贵w
芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?抗體
氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶抗體
賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體
錨蛋白重復(fù)域6抗體
精氨酸酶2抗體
醛固酮還原酶家族1成員C3抗體
促腎上腺皮質(zhì)激素受體
褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體
腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體
Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體
腺相關(guān)病毒5 VP1抗體
脂肪醛脫氫酶抗體
抗利尿激素1A抗體
抗利尿激素受體1B抗體
二磷酸腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷酸交換因子2抗體
α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體
脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體