商品介紹：

中文名稱：kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式)

英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T

產(chǎn)品貨號：LZ-01X6430

發(fā)貨周期：1～3天

公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
無孢蛋白(ASPN)英文名稱：ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml

吻受體(KISS1R)英文名稱：KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體包裝5ml

吻1(KISS1)英文名稱：KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體包裝1g

胃泌抑制肽(GIP)英文名稱：GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體包裝5g

胃泌(GT)英文名稱：GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g

胃蛋白原C(PGC)英文名稱：PGC ELISA Kit上皮類癌相關(guān)抗原抗體包裝25g

胃蛋白原A(PGA)英文名稱：PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g

味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱：TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g

尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱：UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g

維生D受體(VDR)英文名稱：VDR ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g

維生D結(jié)合蛋白(DBP)英文名稱：DBP ELISA Kit8號染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g

維生B9(VB9)英文名稱：VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg

維X受體α(RXRα)英文名稱：RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g

圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱：PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g

微粒體S轉(zhuǎn)移1(MGST1)英文名稱：MGST1 ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體包裝5g

彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白G試劑盒風(fēng)疹病IgG抗體參考品

銀耳Tremella│fuciformis 質(zhì)量規(guī)格：含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風(fēng)疹病IgM抗體參考品

筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97.0%，標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯維生B12Elisa

白酒  酒精度 3,4,5-三噠維生B2Elisa

桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯維生B6Elisa

線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮維生CElisa

枯草芽孢桿 4-苯乙維生DElisa

紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維生D2Elisa

釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽維生D3Elisa

塔賓曲霉 4--3-乙基維生D受體Elisa

釀酒酵母 單水合物維生EElisa

pAAV-RC2 4--2-氟苯磺酰維生K1Elisa

蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維生K2Elisa

光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓Ⅱ相關(guān)肽Elisa

蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓IIElisa

草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-AgElisa

雞葡萄球 環(huán)己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標(biāo)志物CA199Elisa