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MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA試劑盒公司正在銷售的產品:MMP-9/FITC 熒光標記質金屬蛋白-9蛋白抗體IgG3-羥 98%MMP-9/FITC 熒光標記質金屬蛋白-9抗體IgG2- 99%MMP-/FITC 熒光標記質金屬蛋白-抗體IgG4,6-二-2-嘧啶 98%MMP-11/FITC 熒光標記質金屬蛋白-11抗體IgG2,4-二嘧啶 98%MMP-12/FIT
產品分類
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ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
產品屬性:
產品名稱 | MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA試劑盒 |
英文名稱 | MUC5AC ELISA Kit |
產品規(guī)格 | 48T/96T |
產品貨號 | LZ-E028639 |
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
操作步驟:
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
靶向核糖核(TR)試劑盒連翹酯HDL-苦杏仁 AR,99.0%氫二鈉 AR(劇品)
靶向核糖核(TR)試劑盒連翹酯F氫化 98%三乙酯 99%
蛋白激C(PKC)試劑盒5--苦參C焦亞硫 CP,94.0%氟化,無水 電子級,粉末
蛋白激C(PKC)試劑盒苦參X1,10-菲羅啉(無水) 99%1,1,1,2-四氟乙烷 99.95%
縮(ALD)試劑盒苦參W三聚磷鈉 AR,98%三 AR,99.0%
縮(ALD)試劑盒苦參N錫鈉 AR,55.3% SnO2烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑,98%
L-乳脫氫(L-LDH)試劑盒苦參S亞硫 AR2,2,2-三氟乙 99.5%
L-乳脫氫(L-LDH)試劑盒苦參L單寧 AR大黃素 ≥90% (HPLC)
性神經鞘磷脂(ASM)試劑盒苦參Q3,4,5-三氧苯 99%石杉 分析標準品
性神經鞘磷脂(ASM)試劑盒苦參O硫脲 ACS, ≥99.0%石杉 99%
花生四烯5脂加氧(ALOX-5)試劑盒苦參R硝氧鋯 水合物 AR,99.5%和厚樸酚 分析標準品
花生四烯5脂加氧(ALOX-5)試劑盒苦參K二氧化鋯 AR,99.0%楊梅素 97%
5脂加氧(5-LO/LOX)試劑盒重樓皂V氫氧化鋯 97%楊梅素 分析標準品,≥98%
5脂加氧(5-LO/LOX)試劑盒重樓皂H硝氧鋯 99%厚樸酚 ≥98% (HPLC)
腺環(huán)化1(AC-1)試劑盒 重樓皂D化鋯 98%楊梅 98%
腺環(huán)化1(AC-1)試劑盒 伊貝A;辛貝素-3-D-葡萄糖式碳鋯(IV) ≥40% ZrO2 basis 分析標準品,≥98%
MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA試劑盒橙是一種熒光色素,其檢測激發(fā)濾光片波長488nm。阻斷濾光片波長515nm。它與細胞中DNA 和RNA 結合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA 結合量少發(fā)綠色熒光,與RNA 結合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA 和RNA 染色。
在熒光顯微鏡下觀察,橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO 常與溴化乙啶EB 合用雙染,因EB 只染死細胞使之產生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
用于細胞核染色時,推薦的橙工作濃度為0.1%。一般孵育條件是室溫避光15 分鐘。由于不同細胞對橙的攝取能力不同,該法不一定適用所有細胞。
儲存:-20℃,避光,有效期12月。